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血浆(plasma)还是血清(serum)?对于大多数涉及Exosome RNA分离的研究,我们推荐使用血浆(plasma)。因为血清收集后在凝血过程中,血小板受到刺激会产生许多Exosome和其他形式的小泡,因此血清中获得的小泡始终比血浆中多,甚至超过50%的小泡来源于血小板。所以血浆是研究病理生理状态下Exosome更好的介质。多数的cricμLating Exosome研究样本使用的是血浆。负压采血之后,血液首先存放入采血管,去除止血带,最初的几毫升不要,因为有压力激活效应,并且被成纤维细胞污染。血液收集应该轻柔并且迅速。颠倒混匀采血管8—10次,与管壁上的抗凝剂混合,但不要为了抗凝而剧烈摇动。离心前管子应该垂直存放,并记录实验室中存放的时间,因为从采血到离心除去细胞和血小板这中间的过程很重要,建议在30min内完成,长时间的存放,而没有及时处理会导致血小板细胞Exosome的进一步释放。血液要尽快处理,在室温条件下分离血浆(或者血清)。所有样品要使用相同的转速和转子类型离心。 |